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技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2019-910
凡是來(lái)源于胚胎、組織器官及外周血，經(jīng)特殊分離方法制備而來(lái)的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱之為原代細(xì)胞。原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的DI一步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性，適宜用于藥物敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。方法1.組織塊培養(yǎng)法組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶（或皿）中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。2.消...
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關(guān)于血清使用的幾點(diǎn)建議1、血清必須貯存-20℃，如存放于4℃，請(qǐng)勿超過(guò)兩周，對(duì)于某些單位一次無(wú)法用完一瓶，可在無(wú)菌條件下將其40-45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中（或血清瓶中），由于血清解凍時(shí)體積會(huì)增加10％，必須預(yù)留此膨脹體積的空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。2、一般公司所提供的血清一般為200ml和500ml裝量，因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清：-20℃→4℃冰箱或冷庫(kù)溶解24小時(shí)→室溫下全溶后再分裝，一般以50ml無(wú)菌離心管中分裝40-45ml。使...
查看更多2019-93
增加你的科研文章影響力的八招看到中國(guó)的論文數(shù)已經(jīng)，但引用量仍舊不盡人意。怎樣提高文章的引用量越來(lái)越引起人們的重視，因?yàn)橐昧繌囊粋€(gè)角度反映出文章影響科學(xué)同行的程度，雖然正負(fù)影響都有可能。我不是大牛，自己文章的引用率也不算高。這里我談?wù)勛约簻\薄的想法和體會(huì)，希望能拋磚引玉，共同促進(jìn)我國(guó)科學(xué)的發(fā)展和影響力。1.酒香不怕巷深，好文不怕沒(méi)人看。很明顯，重要的是文章的質(zhì)量。很多諾貝爾獎(jiǎng)級(jí)的文章并不是發(fā)表在《Nature》或《Science》上的。好文章發(fā)表在二流雜志上剛開始沒(méi)人注意，但...
查看更多2019-92
培養(yǎng)細(xì)胞是醫(yī)學(xué)研究生的基本功。細(xì)胞嬌貴，一不小心容易出問(wèn)題。作為新手培養(yǎng)細(xì)胞要注意那些呢。1、不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候，熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來(lái)。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當(dāng)然會(huì)變堿。如果不燒瓶口的話，你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)...
查看更多2019-830
細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染1.細(xì)胞培養(yǎng)(HEK293T)1)顯微鏡下觀察細(xì)胞，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，去上清；2)加入預(yù)熱的PBS3ml,溫柔地清洗細(xì)胞,棄去PBS；3)用胰蛋白酶消化細(xì)胞，通常75cm2培養(yǎng)瓶的貼壁細(xì)胞用3ml胰蛋白酶于37oC處理5min；4)待細(xì)胞脫落后，加入5mlDMEM培養(yǎng)液(含10%FBS)以終止消化反應(yīng)，并將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移入15ml或50ml離心管中；5)1000rpm離心5min，去除上清；6)加入10mlDMEM培養(yǎng)液(含10%FBS)，重新懸浮細(xì)胞，使細(xì)胞充分...
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