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更新時間:2025-12-30

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賽默飛lipo2000轉染試劑現(xiàn)貨優(yōu)惠價

   在分子與細胞生物學研究中,將外源基因高效導入哺乳動物細胞是進行功能驗證、蛋白表達及基因編輯等工作的核心步驟。陽離子脂質體轉染法因其操作相對簡便、適用細胞范圍廣而成為廣泛采用的技術之一。在眾多商業(yè)試劑中,lipo2000轉染試劑作為該領域的代表性產(chǎn)品,以其經(jīng)過長期驗證的可靠性和對多種細胞系的適用性,為研究人員提供了一種穩(wěn)定的核酸遞送解決方案。

   lipo2000轉染試劑,即Lipofectamine2000,是一種基于專有陽離子脂質配方的轉染試劑。其工作原理是通過帶正電的脂質體與帶負電的核酸(如質粒DNA)自發(fā)形成穩(wěn)定的納米復合物。這些復合物通過細胞的內存作用等途徑進入細胞后,能夠將核酸有效釋放到細胞質中,從而實現(xiàn)基因的瞬時高效表達。

一、核心性能與規(guī)格特點

   作為一款成熟的轉染工具,lipo2000轉染試劑的設計注重標準化與結果的重復性,其主要特點包括:

   廣泛驗證的轉染效率:該試劑在多種常見貼壁細胞系(如HEK293、HeLa、COS-7等)中表現(xiàn)出較高的DNA轉染效率,支持基因的過表達研究。

   適用于多種核酸類型:lipo2000轉染試劑不僅可用于質粒DNA的轉染,也適用于小于擾RNA(siRNA)的遞送,以進行基因功能敲低研究。

   相對簡化的操作流程:其標準方案通常要求在無血清培養(yǎng)基(如Opti-MEM)中稀釋試劑與核酸,混合孵育形成復合物后直接加入細胞。這種經(jīng)過優(yōu)化的流程有助于新用戶快速建立實驗方法。

   包裝規(guī)格的實用性:提供從0.75mL、1.5mL到更大體積的多種包裝規(guī)格,以適應不同實驗規(guī)模的需求,從初期的條件優(yōu)化到后續(xù)的大規(guī)模穩(wěn)定轉染。

二、與相近轉染試劑的關鍵規(guī)格區(qū)別

   在具體的實驗設計中,了解lipo2000轉染試劑與Lipofectamine家族其他成員(如Lipofectamine3000,RNAiMAX)的區(qū)別,有助于根據(jù)實驗目標做出更精準的選擇。其主要區(qū)別體現(xiàn)在應用側重與性能優(yōu)化上:

   對比維度lipo2000轉染試劑Lipofectamine3000試劑LipofectamineRNAiMAX試劑

   核心設計目標為質粒DNA轉染而優(yōu)化,亦可進行siRNA轉染。為質粒DNA轉染進一步優(yōu)化,尤其針對某些難轉染細胞,常表現(xiàn)出比2000更高的DNA轉染效率。專門為siRNA/miRNA遞送而設計,旨在實現(xiàn)更高的基因沉默效率和更低的細胞毒性。

   關鍵附加組分主要為陽離子脂質體。包含脂質體與P3000™增強劑,該增強劑有助于提升DNA轉染性能。為RNA干擾應用優(yōu)化的專用脂質配方。

   在DNA轉染中的表現(xiàn)在多種細胞系中提供可靠的DNA轉染效率。通常能提供更高的DNA轉染效率,尤其是在難轉染細胞中,是進行關鍵過表達實驗的升級選擇。不推薦用于DNA轉染。

   在RNAi實驗中的表現(xiàn)可以完成siRNA轉染,但并非專門優(yōu)化。不推薦專門用于siRNA轉染。通常能提供更高的基因敲低效率和更好的細胞狀態(tài)保持,是RNA干擾實驗的推薦選擇。

三、應用指南與優(yōu)化建議

   lipo2000轉染試劑常用于以下研究場景:

   基因的瞬時過表達分析:用于報告基因檢測、信號通路研究、病毒包裝等。

   siRNA介導的基因功能缺失初篩:可用于初步的基因敲低實驗。

   為獲得理想的轉染結果,建議在以下方面進行優(yōu)化:

   細胞狀態(tài):確保轉染時細胞處于對數(shù)生長期,密度適宜(通常為60-90%融合度)。

   核酸質量與用量:使用高純度、無菌的質粒DNA或siRNA。針對目標細胞系,需要通過預實驗優(yōu)化核酸的用量。

   試劑與核酸比例:嚴格按照說明書推薦的范圍進行測試,找到針對特定細胞系配比,這是優(yōu)化的關鍵。

   復合物孵育時間:遵循建議的孵育時間(通常20-30分鐘),避免時間過長。

   細胞類型驗證:對于新型或難轉染的細胞系,建議查閱文獻或進行預實驗以確認lipo2000轉染試劑的適用性,有時可能需要選擇Lipofectamine3000或其他專用試劑。

總結

   總而言之,lipo2000轉染試劑作為一款經(jīng)過長期實踐檢驗的轉染工具,為常規(guī)哺乳動物細胞的核酸遞送提供了一個穩(wěn)定且標準化的基礎方案。其價值在于操作的便捷性和對多種細胞及核酸類型的廣泛適用性。然而,隨著技術發(fā)展,更高效或更專一的轉染試劑不斷涌現(xiàn)。在具體研究中,理解其核心特點、掌握優(yōu)化方法,并能夠根據(jù)具體的細胞類型、核酸種類(DNAvs.RNAi)及實驗目標,與Lipofectamine家族其他成員進行合理選擇與比較,是實現(xiàn)高效、低毒轉染的關鍵。對于剛剛建立轉染平臺的實驗室而言,lipo2000轉染試劑仍是一個可靠的起點。


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